近年来，随着生物药物的需求逐渐增加，许多科学领域开始针对肽和蛋白质进行位点特异性修饰的开发。这些修饰后的蛋白质偶联物对于化学治疗、成像、诊断、生物催化和生物传感器在很大程度上有着举足轻重的应用。过去，蛋白质的修饰主要依赖于特定氨基酸（例如赖氨酸、半胱氨酸、甲硫氨酸或苏氨酸）的反应性，并且可能需要大量优化才能获得产品。相比之下，转肽酶的使用即可使化学官能团安装到适当的多肽上。另一方面，尽管其中细菌分选酶是历来使用的最多的一种，但最近对于植物天冬酰胺内肽酶的研究也发现了它们的高催化效率和最小识别基序是对蛋白质修饰特别有利的一个方向。所以，有鉴于转肽酶的使用受限于需要制备要连接的合成肽缀合物、产品中剩余的庞大识别标签以及低效的底物周转。最近，The University of Queensland的Thomas Durek教授和David J. Craik教授在J. Am. Chem. Soc.上发表了一种酶促方式实现的C端蛋白质工程修饰，可直接将胺化物与蛋白质末端结合。
图片来源：J. Am. Chem. Soc.
这种肽/蛋白质标记策略利用工程化的转肽酶，可将具有天冬酰胺残基的蛋白质C端以不可逆的方式结合各种不同的胺化物。
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且为了证明这种方法的实用性，他们也利用这种方法制备了一种蛋白质-药物偶联物，借此产生遗传方法上无法获得的 C-to-C 蛋白质融合，并在连续步骤中对单个蛋白质的两个末端进行了位点特异性标记。
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参考文献：Enzymatic C‑Terminal Protein Engineering with Amines
J. Am. Chem. Soc. 2021,jacs.1c08976
原文作者：FabianB. H. Rehm,† Tristan J. Tyler,† Kuok Yap, Simon J. de Veer, David J. Craik,*and Thomas Durek*
https://pubs.acs.org/doi/pdf/10.1021/jacs.1c08976
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