因此，为了解决上述问题，作者进一步开发了第二代制备路线

鉴于硼酸酯3成本较高，作者首先着手解决该化合物的成本问题。

他们选择市售较为便宜的3-溴-2-甲基苯甲酸为起始物料：

选择3-溴-2-甲基苯甲酸为起始物料的考虑主要有两点：该化合物与目标频哪醇硼酸酯3具有相同的氧化态，这有利于尽可能地减少官能化操作；其次，结构上的一致性也有利于转化。

苯甲酸10经氯化亚砜处理为相应的酰氯后，在乙腈中与氨水反应，即可高效地转化为相应的苯甲酰胺11，两步产率达到85%；随后，再次经过氯化亚砜在室温条件下进行处理，转化为氰基化合物12；最后，使用钯催化与联硼酸频那醇酯发生偶联（Miyaura硼化反应），即可制备得到相应的硼酸酯3。从起始物10计算，制备硼酸酯3的总收率为57%。

虽然总收率仅为中等，但是这四个步骤都不需要经过柱色谱纯化，后处理操作简便，使得工艺具有生产价值。最终，该工艺条件应用于几千公斤级别的硼酸酯3的生产。

解决了硼酸酯3的成本问题后。接下来，作者继续研究Suzuki偶联和Sonogashira偶联反应：

继续研究发现，Suzuki偶联反应产率低的原因在于：硼酸酯3于底物2进行偶联制备期望化合物4后，进一步于4发生偶联，得到双重偶联副产物13。这导致期望产物产率降低，反应中原料2剩余，后处理困难。

为了降低副产物13的生成，作者尝试了低浓度或缓慢滴加硼酸酯3，收效甚微。进一步，筛选了溶剂、催化剂、碱以及不同的反应温度，都没有获得较好的解决方案。

最后，在该反应终点，加入二甲基乙二胺，反应中过量的底物2，由于其亲电性更好，与二甲基乙二胺形成加合物，只需通过酸性水洗，即可除去。反应中剩下的产物4和副产物13，尝试重结晶纯化，效果不佳。由于这两个化合物极性差别较大，很容易通过色谱柱纯化，获得高纯度的期望化合物4。

经过该优化，Suzuki偶联反应收率稳定在28%，化合物4纯度大于98%。

（小编认为，28%收率还是需要想办法解决的。根据作者所述，通过反应条件优化提高可能性不大。因此，解决的办法主要是寻找可代替2的化合物。）

随后，研究Sonogashira偶联反应。

由于早期研发阶段，Sonogashira偶联反应重现性差，TMS保护的炔烃稳定性差，并且随后需要使用具有腐蚀性的含氟试剂脱TMS。作者将TMS乙炔更换为TIPS乙炔。Sonogashira反应表现优秀，在温和的条件下，完成转化，经过MTBE和正庚烷重结晶后，收率为93%，纯度大于99%。

进一步探索TIPS基团的脱去，发现：四丁基氟化胺同样可以用于该基团的脱去，但是分离收率70%，并且随着脱保护时间的延长，产物进一步发生自身偶联，得到非期望的烯炔化合物。随后，尝试加入添加剂，当加入乙酸时，反应在两个小时内完成，并且没有烯炔副产物，脱TIPS的炔烃分离收率为75%；使用水为添加剂，TBAF用量下降至0.2当量，反应只需30分钟，收率提高至78%。

但是，为了避免使用具有腐蚀性的含氟试剂，作者进一步筛选反应条件。结果发现，四丁基羟铵（nBu4NOH）为优选的试剂，在0.2当量无添加剂条件下，反应30分钟即可获得70%目标化合物，在添加磷酸氢钾（K2HPO4）后，分离收率提高至96%，并且反应很干净。

虽然优化后，Suzuki反应得到了改善，并且Sonogashira反应的重现性也得到了解决。但是，Suzuki反应仍然存在选择性差等缺陷。为此，作者设计开发了新的构建嘧啶环的方法：通过胍和β-酮酸酯构建。

因此，选取市售便宜的2-甲基-3-溴苯胺17出发，经过重氮化、氰基转化，得到腈8；随后经过异丙基氯化镁处理为相应的格氏试剂，再和二氧化碳反应，得到苯甲酸衍生物9；最后，使用草酰氯转化为相应的酰氯后，在三乙胺存在下，与KO2CCH2CO2Et转化为所需β-酮酸酯20，三步反应总收率约49%。

β-酮酸酯20与胍碳酸盐在三氟乙醇中回流，制备得到75%的嘧啶衍生物21；接着使用三氯氧磷处理，转化为关键化合物4，收率89%。

后续，采用之前优化方法，与TIPS乙炔进行Sonogashira偶联、nBu4NOH和亚磷酸氢钾处理脱去TIPS基团，高效转化为炔6。

最后，再和优化后，原位制备的叠氮9进行Click反应，完成目标化合物AB928的制备。

第二代生产路线，关键炔烃片段6的合成收率为29%，目标化合物AB928总收率为15%。

来源“化解 Chem”