9个导致HPLC基线漂移的因素!

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来源:SIGMA-ALDRICH公司/PharmaGMP,药物分析之家
本期的分享来自于SIGMA-ALDRICH公司的一本指南,HPLC Troubleshooting Guide


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1.柱温的影响
柱温的影响对于部分检测器,尤其是示差折光检测器或者高灵敏度的紫外检测器,对于柱温模块的影响,通常导致的是基线有规律的上升和下降;处理方法中有一条,在进入检测器前加上换热器,不过换热器是个什么东东,貌似并没有用过。

2. 流动相不均匀 这个原因导致的基线漂移通常是不规则的,与前一条柱温的影响不同,流动相的污染或者不均匀会导致基线的升高,采用HPLC级别的溶剂或者高纯度的盐或添加剂,并对流动相进行脱气可以解决流动相不均匀导致的基线漂移问题。

3. 检测器流通池污染或有气泡
检测器流通池的污染之前好像提到过,今天重点说一下解决的方法,采用极性强的溶剂(比如甲醇)对检测池进行冲洗,如有必要,用1N浓度的稀硝酸进行冲洗,特别需要提示的是,采用稀硝酸进行冲洗的时候不要接PEEK接头,也不要采用盐酸进行冲洗;

4. 检测器出口管线拧得过紧,这会导致检测池的背压太高,导致检测池可能产生裂纹,从而导致基线的升高,如果检测池真的损坏了,只能考虑对检测池进行更换了;

5. 流动相混合的问题或流速的变化
流动相混合的问题及流速问题是在这几天的分享中常见的问题了,解决方法之前也提到过,在遇到问题的时候需要特别注意输液泵的工作状态;

6. 色谱柱平衡不充分,尤其是更换流动相的时候
对此指南给出的解决方法是采用中极性强度的溶液,在分析前对色谱柱进行冲洗,冲洗的体积通常需要达到10-20倍的色谱柱体积

7. 流动相的污染,尤其是没有采取高纯度的试剂

8. 样品物质的强保留属性,导致峰的严重展宽,从而表现为基线的抬升
注意这里的表述,表现为基线的抬升,实际上是被测组份的强保留,这里的基线漂移实际上是检测组分的缓慢洗脱。

9. 检测器设置错误,这种错误应该不常见,有兴趣有朋友可以自行查阅原文。




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