Nat. Methods | 超长transient增强轨道阱单离子质谱的灵敏度与分辨率

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分享一篇nature methods上的文章“Ultralong transients enhance sensitivity and resolution in Orbitrap-based single-ion mass spectrometry”,本文通讯作者是来自乌得勒支大学的Victor C. Yin与Albert J. R. Heck 教授,研究方向为生物分子质谱与蛋白质组学

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原生质谱是鉴定非共价生物大分子的有力手段,轨道阱质谱有高分辨率、能到百万道尔顿级别的高质量分析的能力,从而被广泛使用。在傅里叶转换质谱技术中,电荷与质量的分辨率,以及信噪比,都可通过检测时记录更长的电流来实现。作者通过修改Thermo QE UHMR质谱仪的数据获取方法以延长约束离子与采集的时间,以提高生物大分子质谱分析时对质量的灵敏度,分辨率与对电荷的准确度。


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作者测试发现经过25s的transient,对800 kDa的GroEL蛋白的分辨率有极其明显地提高,并且结合吸收模式傅里叶变换技术,可进一步将分辨率提高到百万级别。同时信噪比也能从相比1s的transient能提高5倍,进而可以更准确地确定电荷状态。低电荷的粒子也能在此模式下得到更好的检出。


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在对apoferritin检测中,普通的原生质谱无法分辨22、23、24聚体不同电荷状态下的一些重叠的质荷比峰,而在作者的采集方法下,增强的分辨率能很好地区分这些寡聚体。作者也利用此技术观测到了气相中该分子不断产生中性丢失的过程。
总的来说,这篇文章通过延长transient时间实现了对轨道阱单离子质谱的灵敏度与分辨率的增强。
本文作者:JGG
责任编辑:WYQ
文章链接:https://www.nature.com/articles/s41592-024-02207-8
文章引用:10.1038/s41592-024-02207-8



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